• mi

Autologno jedro pulposus, implantirano v ledveno subhondralno kost, da ustvari živalski model modnih sprememb

Hvala za obisk Nature.com. Različica brskalnika, ki jo uporabljate, ima omejeno podporo CSS. Za najboljše rezultate priporočamo uporabo novejšega brskalnika (ali onemogoči način združljivosti v Internet Explorerju). Medtem bomo za zagotovitev nadaljnje podpore prikazali spletno mesto brez stilov in javascripta.
Vzpostavitev živalskih modelov modnih sprememb (MC) je pomembna podlaga za preučevanje MC. Petinštirideset novozelandskih belih zajcev so bili razdeljeni na skupino lažnih operacij, skupino za implantacijo mišic (ME Group) in Nucleus Pulposus Implantation Group (NPE Group). V skupini NPE je bil medvretenčni disk izpostavljen z anterolateralnim ledvenim kirurškim pristopom, igla pa je bila uporabljena za prebijanje telesa vretenc L5 blizu končne plošče. NP smo iz medvretenčnega diska L1/2 ekstrahirali z brizgo in vbrizgali vanj. Vrtanje luknje v subhondralni kosti. Kirurški posegi in metode vrtanja v skupini za implantacijo mišic in skupina za lažno delo so bili enaki kot v NP implantacijski skupini. V skupini ME je bil v luknjo nameščen košček mišice, medtem ko v skupini s sramoto ni bilo nič nameščenega v luknjo. Po operaciji smo izvedli MRI skeniranje in molekularno biološko testiranje. Signal v skupini NPE se je spremenil, vendar ni bilo očitne spremembe signala v skupini s sramoto in skupino ME. Histološko opazovanje je pokazalo, da je bilo na mestu implantacije opaziti nenormalno proliferacijo tkiva, ekspresija IL-4, IL-17 in IFN-γ pa se je v skupini NPE povečala. Implantacija NP v subhondralno kost lahko tvori živalski model MC.
Modične spremembe (MC) so lezije vretenčnih končnih plošč in sosednjega kostnega mozga, vidne na slikanju z magnetno resonanco (MRI). Pri posameznikih s pripadajočimi simptomi so precej pogosti. Številne študije so poudarile pomen MC zaradi svoje povezanosti z bolečino v spodnjem delu hrbta (LBP) 2,3. De Roos et al.4 in Modic et al.5 sta neodvisno opisala tri različne vrste nepravilnosti subhondralnega signala v vretenčnem kostnem mozgu. Spremembe MODIC tipa I so hipointenzivne na T1-tehtanih (T1W) zaporedjih in hiperintenziji na sekvencah T2-tehtanih (T2W). Ta lezija razkriva razpoke končnih plošč in sosednjega žilnega granulacijskega tkiva v kostnem mozgu. Spremembe MODIC Type II kažejo visok signal tako v zaporedjih T1W kot T2W. Pri tej vrsti lezije lahko najdemo uničenje končne plošče, pa tudi histološko maščobno nadomestitev sosednjega kostnega mozga. Spremembe MODIC Type III kažejo nizek signal v zaporedjih T1W in T2W. Sklerotične lezije, ki ustrezajo končnim ploščam, so opazili6. MC velja za patološko bolezen hrbtenice in je tesno povezan s številnimi degenerativnimi boleznimi hrbtenice7,8,9.
Glede na razpoložljive podatke je več raziskav dalo podroben vpogled v etiologijo in patološke mehanizme MC. Albert et al. je predlagal, da MC povzroči disk herniacija8. Hu et al. pripisan MC za hudo degeneracijo diska10. Kroc je predlagal koncept "notranjega diska", ki navaja, da lahko ponavljajoča travma diskov v končni plošči vodi do mikrotera. Po tvorbi razcepkov lahko uničenje končne plošče s pulposusom jedra (NP) sproži avtoimunski odziv, kar še dodatno vodi do razvoja MC11. Ma et al. delila podobno stališče in poročala, da ima avtoimunost, ki jo povzroča NP, ključno vlogo pri patogenezi MC12.
Celice imunskega sistema, zlasti limfociti CD4+ T, igrajo kritično vlogo pri patogenezi avtoimunosti13. Nedavno odkrita podskupina Th17 proizvaja vnetni citokin IL-17, spodbuja ekspresijo hemokina in stimulira T celice v poškodovanih organih, da ustvari IFN-γ14. Th2 celice igrajo tudi edinstveno vlogo pri patogenezi imunskih odzivov. Izražanje IL-4 kot reprezentativne celice TH2 lahko privede do hudih imunopatoloških posledic15.
Čeprav je bilo izvedenih veliko kliničnih študij na MC16,17,18,19,20,22,23,24 Uporablja se za raziskovanje etiologije ali novih načinov zdravljenja, kot je ciljna terapija. Do danes so poročali le o nekaj živalskih modelih MC, ki so preučevali osnovne patološke mehanizme.
Na podlagi avtoimunske teorije, ki sta jo predlagala Albert in MA, je ta študija vzpostavila preprost in ponovljiv model zajca MC z avtotransplantiranjem NP v bližini izvrtane končne plošče vretenc. Drugi cilji so opazovati histološke značilnosti živalskih modelov in oceniti posebne mehanizme NP pri razvoju MC. V ta namen uporabljamo tehnike, kot so molekularna biologija, MRI in histološke študije za preučevanje napredovanja MC.
Dva zajca sta umrla zaradi krvavitve med operacijo, štirje zajci pa so med Anestezijo umrli med MRI. Preostalih 48 zajcev je preživelo in po operaciji ni pokazalo nobenih vedenjskih ali nevroloških znakov.
MRI kaže, da je intenzivnost signala vgrajenega tkiva v različnih luknjah različna. Intenzivnost signala vretenčnega telesa L5 v skupini NPE se je postopoma spreminjala v 12, 16 in 20 tednov po vstavitvi (zaporedje T1W je pokazalo nizek signal, zaporedje T2W Od drugih dveh skupin vgrajenih delov sta v istem obdobju ostala razmeroma stabilna (slika 1A, b).
(A) Reprezentativni zaporedni MRI zajece ledvene hrbtenice v 3 časovnih točkah. Na slikah skupine sramote ni bilo najdenih nepravilnosti signala. (B) Signalne značilnosti telesa vretenc v skupini ME so podobne tistim v skupini za lažno delo in na mestu vdelave se sčasoma ne opazijo pomembne spremembe signala. (C) V skupini NPE je nizki signal jasno viden v zaporedju T1W, mešani signal in nizki signal pa sta jasno vidna v zaporedju T2W. Od 12-tedenskega obdobja do 20-tedenskega obdobja se sporadični visoki signali, ki obdajajo nizke signale v zaporedju T2W, zmanjšajo.
Očitno hiperplazijo kosti lahko opazimo na mestu implantacije telesa vretenc v skupini NPE, kostna hiperplazija pa se pojavi hitreje od 12 do 20 tednov (slika 2C) v primerjavi s skupino NPE, pri modeliranem vretencu ni opaziti pomembne spremembe telesa; Sham Group in Me Group (sl. 2C) 2A, b).
(A) Površina telesa vretenc na vsadljenem delu je zelo gladka, luknja se dobro zaceli in v telesu vretenca ni hiperplazije. (B) Oblika vsadljenega mesta v skupini ME je podobna kot v lažni operacijski skupini in ni očitne spremembe pojava vsadljenega mesta sčasoma. (C) Kostna hiperplazija se je pojavila na vsadnem mestu v skupini NPE. Kostna hiperplazija se je hitro povečala in se celo razširila skozi medvretenčni disk do kontralateralnega vretenčnega telesa.
Histološka analiza ponuja podrobnejše informacije o tvorbi kosti. Slika 3 prikazuje fotografije pooperativnih odsekov, obarvanih s H&E. V skupini za lažno delo so bili hondrociti dobro razporejeni in ni bilo odkrito celično proliferacijo (slika 3A). Razmere v skupini ME so bile podobne kot v skupini za lažno delo (slika 3B). Vendar so v skupini NPE na mestu implantacije opazili veliko število hondrocitov in proliferacijo celic, podobnih NP (slika 3C);
(A) Trabekule je mogoče videti v bližini končne plošče, hondrociti so lepo razporejeni z enakomerno velikostjo in obliko celice in brez širjenja (40 -krat). (B) Pogoj mesta implantacije v skupini ME je podobno kot v skupini Sham. Trabecule in hondrocite je mogoče videti, vendar na mestu implantacije ni očitnega širjenja (40 -krat). (B) Vidimo, da se hondrociti in NP-podobne celice znatno širijo, oblika in velikost hondrocitov pa sta neenakomerna (40-krat).
Ekspresijo mRNA interlevkina 4 (IL-4), mRNA interlevkina 17 (IL-17) in interferona γ (IFN-γ) mRNA so opazili tako v skupinah NPE kot M. Ko so primerjali ravni ekspresije ciljnih genov, so se genski izrazi IL-4, IL-17 in IFN-γ znatno povečali v skupini NPE v primerjavi s stopnjami skupine ME in Sham Operation Group (slika 4) (P <0,05). V primerjavi s sramotno operacijsko skupino so se ravni ekspresije IL-4, IL-17 in IFN-γ v skupini ME povečale le rahlo in niso dosegle statističnih sprememb (p> 0,05).
Ekspresija mRNA IL-4, IL-17 in IFN-γ v skupini NPE je pokazala bistveno višji trend kot tista v lažni operacijski skupini in ME skupini (p <0,05).
V nasprotju s tem ravni izražanja v skupini ME niso pokazale pomembne razlike (p> 0,05).
Analiza Western Blot je bila izvedena z uporabo komercialno dostopnih protiteles proti IL-4 in IL-17, da se potrdi spremenjeni vzorec ekspresije mRNA. Kot je prikazano na slikah 5A, se je B v primerjavi s skupino ME in sramotno operacijsko skupino beljakovin IL-4 in IL-17 v skupini NPE znatno povečal (p <0,05). V primerjavi s sramotno operacijsko skupino ravni beljakovin IL-4 in IL-17 v skupini ME prav tako niso dosegli statistično pomembnih sprememb (p> 0,05).
(A) Ravni beljakovin IL-4 in IL-17 v skupini NPE so bile bistveno višje od tistih v skupini ME in placebo (P <0,05). (B) Histogram Western blot.
Zaradi omejenega števila vzorcev ljudi, pridobljenih med operacijo, so jasne in podrobne študije o patogenezi MC nekoliko težke. Poskusili smo vzpostaviti živalski model MC za preučevanje njegovih potencialnih patoloških mehanizmov. Hkrati smo uporabili radiološko oceno, histološko oceno in molekularno biološko oceno za sledenje potek MC, ki ga povzroča NP Autograft. Kot rezultat tega je model implantacije NP povzročil postopno spremembo intenzivnosti signala iz 12-tedenskih do 20-tedenskih časovnih točk (mešani nizki signal v zaporedjih T1W in nizki signal v zaporedjih T2W), kar kaže na spremembe tkiva ter histološke in molekularne spremembe Biološke ocene so potrdile rezultate radiološke študije.
Rezultati tega poskusa kažejo, da so se vizualne in histološke spremembe zgodile na mestu kršitve telesa vretenc v skupini NPE. Obenem smo opazili ekspresijo genov IL-4, IL-17 in IFN-γ ter IL-4, IL-17 in IFN-γ, kar kaže, da je kršitev avtolognega jedra pulposus tkiva v vretenci Telo lahko povzroči vrsto signalnih in morfoloških sprememb. Zlahka je ugotoviti, da so značilnosti signala vretenčnih teles živalskega modela (nizki signal v zaporedju T1W, mešani signal in nizki signal v zaporedju T2W) zelo podobne kot v človeških vretenčnih celicah, tudi MRI značilnosti Potrdite opazovanja histologije in bruto anatomije, to je, da so spremembe telesnih celic vretenc progresivne. Čeprav se lahko vnetni odziv, ki ga povzroči akutna travma, pojavi kmalu po preboju, so rezultati MRI pokazali, da se je postopno povečevanje sprememb signala pojavilo 12 tednov po preboju in je trajalo do 20 tednov brez znakov okrevanja ali preobrata sprememb MRI. Ti rezultati kažejo, da je avtologni vretenčni NP zanesljiva metoda za vzpostavitev progresivnega MV pri kuncih.
Ta model punkcije zahteva ustrezno spretnost, čas in kirurški napor. V predhodnih poskusih lahko disekcija ali prekomerna stimulacija paravertebralnih ligamentnih struktur povzroči nastanek vretenčnih osteofitov. Paziti je treba, da ne poškodujejo in ne dražijo sosednjih diskov. Ker je treba globino penetracije nadzorovati, da dosežemo dosledne in ponovljive rezultate, smo ročno naredili čep z odrezanjem plašča 3 mm dolge igle. Uporaba tega vtiča zagotavlja enakomerno globino vrtanja v telesu vretenc. V predhodnih poskusih so trije ortopedski kirurgi, ki sodelujejo v operaciji, ugotovili, da je 16-metrska igla lažja za delo z iglami z 18 merilniki ali drugimi metodami. Da bi se izognili prekomerni krvavitvi med vrtanjem, bo držanje igle še nekaj časa še bolj primerno luknjo vstavitve, kar kaže na to, da je mogoče na ta način nadzorovati določeno stopnjo MC.
Čeprav so številne študije ciljale na MC, je o etiologiji in patogenezi MC25,26,27 znano malo. Na podlagi naših prejšnjih študij smo ugotovili, da ima avtoimunost ključno vlogo pri pojavu in razvoju MC12. Ta študija je preučila kvantitativno izražanje IL-4, IL-17 in IFN-γ, ki so glavne poti diferenciacije celic CD4+ po stimulaciji antigena. V naši raziskavi je imela v primerjavi z negativno skupino skupino NPE višjo ekspresijo IL-4, IL-17 in IFN-γ, ravni beljakovin IL-4 in IL-17 pa so bile tudi višje.
Klinično se v celicah NP poveča IL-17 mRNA ekspresija pri bolnikih z diskomsko herniacijo28. Povišane ravni ekspresije IL-4 in IFN-γ so bile ugotovljene tudi v akutnem modelu hernije, ki se ne kompresivno diska v primerjavi z zdravimi kontrolami29. IL-17 ima ključno vlogo pri vnetju, poškodbah tkiv pri avtoimunskih boleznih30 in poveča imunski odziv na IFN-γ31. Poročali so o izboljšani poškodbi tkiva, ki jo posreduje IL-17, pri miših MRL/LPR in miši, ki so dovzetni za avtoimuniteto, so poročali o miših, ki jih je treba dovzeti MRL/LPR. IL-4 lahko zavira ekspresijo vnetnih citokinov (na primer IL-1β in TNFα) in aktivacije makrofaga34. Poročalo se je, da je bila mRNA ekspresija IL-4 v skupini NPE drugačna v primerjavi z IL-17 in IFN-γ hkrati; Ekspresija mRNA IFN-γ v skupini NPE je bila bistveno večja kot v drugih skupinah. Zato je lahko proizvodnja IFN-γ mediator vnetnega odziva, ki ga povzroči interkalacija NP. Študije so pokazale, da IFN-γ nastaja z več vrstami celic, vključno z aktiviranimi pomožnimi celicami tipa 1, naravnimi celicami ubijalcev in makrofagi35,36 in je ključni protivnetni citokin, ki spodbuja imunske odzive37.
Ta študija kaže, da je lahko avtoimunski odziv vključen v pojav in razvoj MC. Luoma in sod. ugotovili, da so signalne značilnosti MC in vidne NP podobne na MRI in obe kažeta visok signal v T2W zaporedju38. Potrjeno je, da so nekateri citokini tesno povezani z pojavom MC, kot je IL-139. Ma et al. je predlagal, da lahko izboklina NP navzgor ali navzdol močno vpliva na pojav in razvoj MC12. Bobechko40 in Herzbein et al.41 sta poročala, da je NP imunotolerantno tkivo, ki od rojstva ne more vstopiti v vaskularno obtok. NP izrastki vnašajo tuje organe v oskrbo s krvjo in s tem posredujejo lokalne avtoimunske reakcije42. Avtoimunske reakcije lahko povzročijo veliko število imunskih dejavnikov, in ko so ti dejavniki neprestano izpostavljeni tkivom, lahko povzročijo spremembe signalizacije43. V tej študiji so prekomerna ekspresija IL-4, IL-17 in IFN-γ tipična imunska dejavnika, kar še dodatno dokazuje tesno povezavo med NP in MCS44. Ta živalski model dobro posnema preboj NP in vstop v končno ploščo. Ta postopek je nadalje razkril vpliv avtoimunosti na MC.
Kot je bilo pričakovano, nam ta živalski model ponuja možno platformo za preučevanje MC. Vendar ima ta model še vedno nekatere omejitve: prvič, v fazi opazovanja živali je treba nekatere vmesne zajce evtanazirati za histološko in molekularno biološko testiranje, zato nekatere živali sčasoma "padejo iz uporabe". Drugič, čeprav so v tej raziskavi nastavljene tri časovne točke, smo na žalost modelirali samo eno vrsto MC (Modic Type I Change), zato ni dovolj, da bi predstavljali proces razvoja človeških bolezni, na nastavitev pa je treba nastaviti še več časovnih točk Bolje upoštevajte vse spremembe signala. Tretjič, spremembe v strukturi tkiva je res mogoče jasno pokazati s histološkim obarvanjem, vendar lahko nekatere specializirane tehnike bolje razkrijejo mikrostrukturne spremembe tega modela. Na primer, za analizo tvorbe fibrocartilage v zajkovih intervertebralnih diskov45 smo na primer uporabili polarizirano svetlobno mikroskopijo. Dolgoročni učinki NP na MC in končno ploščo zahtevajo nadaljnjo študijo.
Petindvajset moških novozelandskih belih zajcev (teža približno 2,5-3 kg, starost 3-3,5 meseca) je bilo naključno razdeljeno na lažno operacijsko skupino, mišično implantacijsko skupino (ME skupina) in živčno implantacijsko skupino (NPE skupina). Vse eksperimentalne postopke je odobril etični odbor bolnišnice Tianjin, eksperimentalne metode pa so bile izvedene v strogi v skladu z odobrenimi smernicami.
Nekatere izboljšave so bile narejene v kirurški tehniki S. Sobajima 46. Vsak zajček je bil nameščen v stranskem položaju za izplačilo in sprednja površina petih zaporednih ledvenih medvretenčnih diskov (IVD) je bila izpostavljena s posterolateralnim retroperitonealnim pristopom. Vsak zajček je dobil splošno anestezijo (20% uretana, 5 ml/kg prek ušesne vene). Od spodnjega roba reber do medeničnega roba, 2 cm ventralni do paravertebralne mišice, je bil narejen vzdolžni rez kože. Desna anterolateralna hrbtenica od L1 do L6 je bila izpostavljena z ostro in tupo disekcijo zgornjega podkožnega tkiva, retroperitonealnega tkiva in mišic (slika 6A). Raven diska je bila določena z uporabo medeničnega roba kot anatomske mejnika za raven diska L5-L6. Uporabite prebojno iglo s 16 merilniki, da vrtate luknjo blizu končne plošče vretenca L5 do globine 3 mm (slika 6B). Uporabite 5-mililitrsko brizgo, da aspirate avtologno jedro pulposus v medvretenčnem disku L1-L2 (slika 6C). Odstranite jedro pulposus ali mišice glede na zahteve vsake skupine. Ko se vrtalna luknja poglobi, se na globoko fascijo, površinsko fascijo in kožo postavijo vpojne šive, pri čemer ne bi poškodovali periostealnega tkiva telesa vretenca med operacijo.
(A) disk L5 - L6 je izpostavljen s posterolateralnim retroperitonealnim pristopom. (B) Uporabite 16-metrsko iglo, da izvrtate luknjo v bližini končne plošče L5. (C) Autologni MF -ji so pobrani.
Splošno anestezijo je bila dana z 20% uretanom (5 ml/kg), ki se daje prek ušesne vene, radiografi ledvene hrbtenice pa so bili ponovljeni pri 12, 16 in 20 tednih pooperativno.
Zajci so bili žrtvovani z intramuskularno injekcijo ketamina (25,0 mg/kg) in intravenskega natrijevega pentobarbitala (1,2 g/kg) pri 12, 16 in 20 tednih po operaciji. Za histološko analizo je bila odstranjena celotna hrbtenica in izvedena je bila realna analiza. Za odkrivanje sprememb v imunskih faktorjih sta bila uporabljena kvantitativna povratna transkripcija (RT-QPCR) in Western blotting.
MRI pregledi so bili opravljeni pri kuncih z uporabo 3,0 T kliničnega magneta (GE Medical Systems, Florence, SC), opremljeni z pravokotnim sprejemnikom tuljave okončin. Zajce smo anestezirali z 20% uretanom (5 ml/kg) prek ušesne vene in nato postavili na supič ​​v magnet z ledveno regijo, osredotočeno na 5-palčno krožno površinsko tuljavo (GE Medical Systems). Za določitev lokacije ledvenega diska od L3-L5 do L5-L6 so bile pridobljene koronalne slike lokalizatorja T2 (TR, 1445 ms; TE, 37 ms). Sagittalne rezine T2-utežene so bile pridobljene z naslednjimi nastavitvami: Hitro zaporedje Spin-Echo s časom ponovitve (TR) 2200 ms in odmevni čas (TE) 70 ms, matrika; vidno polje 260 in osem dražljajev; Debelina rezanja je bila 2 mm, vrzel 0,2 mm.
Potem ko je bila posneta zadnja fotografija in je bil ubit zadnji zajec, so bili za histološki pregled odstranjeni lažni, mišični in NP diski. Tkiva smo 1 teden fiksirali v 10% nevtralnega buferiranega formalina, dekalcificirani z etilendiaminetetraocetno kislino in parafin. Tkivni bloki so bili vgrajeni v parafin in razrezani na sagitalne odseke (debele 5 μm) z mikrotomom. Odseki smo obarvali s hematoksilinom in eozinom (H&E).
Po zbiranju medvretenčnih diskov iz zajcev v vsaki skupini je bila skupna RNA izvlečena z uporabo stolpca Uniq-10 (Shanghai Sangon Biotechnology Co., Ltd., Kitajska) v skladu z navodili proizvajalca in sistema za obratno transkripcijo II II (Promega Inc. , Madison, WI, ZDA). Izvedena je bila povratna transkripcija.
RT-QPCR je bil izveden z uporabo Prism 7300 (Applied Biosystems Inc., ZDA) in SYBR Green Jump Start Taq ReadyMix (Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, ZDA) v skladu z navodili proizvajalca. Prostornina PCR je bila 20 μl in je vsebovala 1,5 μl razredčene cDNA in 0,2 μm vsakega temeljnega premaza. Primer je zasnoval Oligoperfect Designer (Invitrogen, Valencia, CA), izdelal pa ga je Nanjing Golden Stewart Biotechnology Co., Ltd. (Kitajska) (tabela 1). Uporabljeni so bili naslednji pogoji toplotnega kolesarjenja: začetni korak aktivacije polimeraze pri 94 ° C 2 min, nato 40 ciklov po 15 s vsak pri 94 ° C za denaturacijo predloge, žarjenje 1 min pri 60 ° C, podaljšek in fluorescenca. Meritve so bile izvedene 1 min pri 72 ° C. Vsi vzorci so bili trikrat amplificirani in povprečna vrednost je bila uporabljena za analizo RT-QPCR. Podatki o amplifikaciji so bili analizirani z uporabo FlexStation 3 (Molekularne naprave, Sunnyvale, CA, ZDA). Ekspresija gena IL-4, IL-17 in IFN-γ so bila normalizirana na endogeno kontrolo (ACTB). Relativne ravni izražanja ciljne mRNA so bile izračunane po metodi 2-ΔΔCT.
Skupni beljakovine smo ekstrahirali iz tkiv z uporabo tkivnega homogenizatorja v puferju za lizo RIPA (ki vsebuje koktajl proteaze in zaviralca fosfataze) in nato centrifugirano pri 13.000 vrt./min. 20 minut pri 4 ° C, da smo odstranili tkivne odpadke. Petdeset mikrogramov beljakovin smo naložili na vozni pas, ločili z 10% SDS-PAGE in nato prenesli na membrano PVDF. Blokiranje je bilo izvedeno v 5% nemasnem suhem mleku v fiziološki raztopini (TBS), ki vsebuje 0,1% Tween 20 1 uro pri sobni temperaturi. Membrano smo inkubirali s primarnim protitelesom proti dekorinam (razredčeno 1: 200; Boster, Wuhan, Kitajska) (razredčeno 1: 200; Bioss, Peking, Kitajska) čez noč pri 4 ° C in reagirali v drugih dneh; S sekundarnim protitelesom (kozji protirabbit imunoglobulin G pri 1: 40.000 redčenju) v kombinaciji s hrenovo peroksidazo (Boster, Wuhan, Kitajska) 1 uro pri sobni temperaturi. Signale Western blota smo odkrili s povečano kemiluminiscenco na kemiluminescentni membrani po rentgenskem obsevanju. Za denzitometrično analizo smo blote pregledali in količinsko opredelili s programsko opremo pasu, rezultati pa so bili izraženi kot razmerje ciljne imunoreaktivnosti gena na imunoreaktivnost tubulina.
Statistični izračuni so bili izvedeni s programskim paketom SPSS16.0 (SPSS, ZDA). Podatki, zbrani med študijo, so bili izraženi kot povprečni ± standardni odklon (srednja vrednost ± SD) in analizirani z uporabo enosmernih ponovljenih ukrepov analize variance (ANOVA) za določitev razlik med obema skupinama. P <0,05 je bil ocenjen kot statistično pomemben.
Tako lahko vzpostavitev živalskega modela MC z vsaditvijo avtolognih NP -jev v vretenčno telo in izvajanjem makroanatomskega opazovanja, analiza MRI, histološka ocena in molekularna biološka analiza lahko postane pomembno orodje za oceno in razumevanje mehanizmov človeškega MC in razvojem novih terapevtskih intervencije.
Kako navajati ta članek: Han, C. et al. Živalski model modnih sprememb je bil vzpostavljen z vsaditvijo avtolognega jedra pulposusa v subhondralno kost ledvene hrbtenice. Sci. Rep. 6, 35102: 10.1038/SREP35102 (2016).
Weishaupt, D., Zanetti, M., Hodler, J., in Boos, N. Magnetno resonančno slikanje ledvene hrbtenice: razširjenost diskovne hernije in zadrževanja, stiskanje živčnih korenin, nepravilnosti končnih plošč in osteoartritis sklepov pri asimptomatskih prostovoljcih . stopnja. Radiologija 209, 661–666, doi: 10.1148/radiologija.209.3.9844656 (1998).
Kjaer, P., Korsholm, L., Bendix, T., Sorensen, JS in Leboeuf-Eed, K. Modic spremembe in njihov odnos do kliničnih ugotovitev. Evropski časopis za hrbtenico: Uradna objava Evropskega društva za hrbtenico, Evropskega društva za hrbtenico in Evropskega društva za raziskave materničnega vratu 15, 1312–1319, doi: 10.1007/s00586-006-0185-X (2006).
Kuisma, M., et al. Modne spremembe v ledvenih vretenčnih končnih ploščah: razširjenost in povezanost z bolečinami v spodnjem delu hrbta in išias pri moških delavcev srednjih let. Hrbtenica 32, 1116–1122, doi: 10.1097/01.Brs.0000261561.12944.ff (2007).
De Roos, A., Kressel, H., Spritzer, K., in Dalinka, M. Mri kostni mozeg se spreminja blizu končne plošče pri degenerativni bolezni ledvene hrbtenice. Ajr. American Journal of Radiology 149, 531–534, doi: 10.2214/ajr.149.3.531 (1987).
Modic, MT, Steinberg, PM, Ross, JS, Masaryk, TJ, in Carter, JR Degenerative Disc Bolear: Ocena sprememb vretenčnega mozga z MRI. Radiologija 166, 193–199, doi: 10.1148/radiologija.166.1.3336678 (1988).
Modic, MT, Masaryk, TJ, Ross, JS in Carter, Jr slikanje degenerativne bolezni diskov. Radiologija 168, 177–186, doi: 10.1148/radiologija.168.1.3289089 (1988).
Jensen, TS in sod. Napovedovalci nevertebralnih končnih plošč (MODIC) signala v splošni populaciji. Evropski časopis za hrbtenico: Uradna objava Evropskega društva za hrbtenico, Evropskega društva za hrbtenico in Evropskega društva za raziskave materničnega vratu, oddelek 19, 129–135, doi: 10.1007/s00586-009-1184-5 (2010).
Albert, HB in Mannisch, K. Modic se spremeni po herniji ledvenega diska. Evropski časopis za hrbtenico: Uradna objava Evropskega društva za hrbtenice, Evropskega društva za hrbtenico in Evropskega društva za raziskave materničnega vratu 16, 977–982, doi: 10.1007/s00586-007-0336-8 (2007).
KERTTULA, L., LUOMA, K., VARMAS, T., Gronblad, M. in Kaapa, E. Spremembe sprememb E. Modic Type I lahko napovedujejo hitro progresivno deformacijsko degeneracijo deformacijskega diska: enoletna prospektivna študija. Evropski časopis za hrbtenico 21, 1135–1142, doi: 10.1007/s00586-012-2147-9 (2012).
Hu, ZJ, Zhao, FD, Fang, XQ in Fan, SW Modic spremembe: Možni vzroki in prispevek k degeneraciji ledvenega diska. Medicinske hipoteze 73, 930–932, doi: 10.1016/j.mehy.2009.06.038 (2009).
KROK, HV Notranji disk. Težave s prolapsom diska v 50 letih. Hrbtenica (Phila PA 1976) 11, 650–653 (1986).


Čas objave: dec-13-2024